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實(shí)驗(yàn)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)有哪些

2019-08-30 [1437]

一年有四個(gè)時(shí)節(jié),每個(gè)時(shí)節(jié)都有不同的景色,而我喜歡秋季起時(shí)的壯麗景色。秋季,人們好象來(lái)到了一個(gè)幽雅安靜的jing界,來(lái)到了一個(gè)晶亮透剔的童話般的。松的那清香,白雪的那冰香,給人一種涼瑩瑩的勸慰。一切都在過(guò)濾,一切都在進(jìn)步,連我的心靈也在凈化,變得純潔而又夸姣。

在ELISA試驗(yàn)前的注意事項(xiàng)
 1、仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)
 2、確認(rèn)試劑盒在有效期內(nèi)
 3、按說(shuō)明書(shū)確認(rèn)一切試劑*(數(shù)量、體積)
 4、標(biāo)本制備要標(biāo)準(zhǔn),每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(儲(chǔ)存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法試驗(yàn)者,注意低溫保存
 5、準(zhǔn)備好一切試驗(yàn)額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
 6、依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確認(rèn)所需試劑的量
 7、按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑

ELISA試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:

 1.正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)別離以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反響,可采用羊血清、兔血清或BSA等關(guān)閉。
 2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的挑選是很重要的,其間包含:
(1)固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方法可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體,在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選:用等量抗原包被,在同一試驗(yàn)條件下進(jìn)行反響,查詢(xún)其顯色反響是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否出色。
 (2)包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有必定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相一同,查詢(xún)陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。挑選OD值大而蛋白量少的濃度。關(guān)于大都蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)一般為1~10μg/ml。

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