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今日揭秘ELISA技巧重點檢測有哪些

2019-11-12 [1597]

又是新的一天,11月過的可真快,仿佛剛剛開始,又到了一半了。實驗不光要注意一些事項還要學會掌握技巧,而實驗是要靠不斷的實行來積累經(jīng)驗的,ELISA試劑盒操作次數(shù)多了自然也就熟練了,而對于ELISA新手來說,在實驗之前掌握技巧可有事半功倍效果。下面就來看看研域(上海)生物今天為您推薦的文章內(nèi)容:新日揭秘ELISA檢測技巧有哪些。       
 
如何防止常見ELISA試劑盒樣品蒸發(fā)?

試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標 板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

研域(上海)化學技術部人員是這樣配制試劑的:
Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請配置標準品及工作液,ELISA試劑盒盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

加樣步驟的經(jīng)驗總結:
加樣或加試劑時,請注意在吸取標本/標準品,酶結合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制 在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。

 在ELISA檢測技巧中,研域(上海)生物建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
在ELISA測定中試劑的準備zui為關鍵的是,ELISA試劑盒在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。
   

 

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